De basis van vriesdrogende culturen (lyofilisatie)
Lyofilisatie, ook bekend als vriesdrogen, is een proces dat wordt gebruikt voor het conserveren van biologisch materiaal door het water uit het monster te verwijderen, waarbij eerst het monster wordt bevroren en vervolgens onder een vacuüm bij zeer lage temperaturen wordt gedroogd. Gevriesdroogde monsters kunnen veel langer worden bewaard dan onbehandelde monsters.
Waarom lyofilisatie wordt gebruikt
Lyofilisatie of vriesdrogen van bacterieculturen stabiliseert de kweken voor langdurige opslag terwijl de schade die kan worden veroorzaakt door het strikt drogen van het monster wordt geminimaliseerd.
Veel micro-organismen overleven goed wanneer ze worden gelyofiliseerd en kunnen gemakkelijk worden gerehydrateerd en gekweekt in kweekmedia, na langdurige opslagperioden.
Lyofilisatie wordt ook gebruikt in de biotechnologische en biomedische industrie om vaccins, bloedmonsters, gezuiverde eiwitten en ander biologisch materiaal te behouden.
Deze korte laboratoriumprocedure kan worden gebruikt met elke commercieel verkrijgbare vriesdroger om uw kweekverzameling te behouden.
Het lyofilisatieproces
Het vriesdroogproces is eigenlijk een toepassing van een fysisch verschijnsel dat sublimatie wordt genoemd: de overgang van een stof van vaste naar een gasvormige toestand, zonder eerst door de vloeibare fase te gaan. Tijdens lyofilisatie wordt het water in het bevroren monster verwijderd als waterdamp, zonder eerst het monster te ontdooien.
Veelgemaakte fouten
Een van de meest voorkomende fouten bij het vriesdrogen is niet het smeltpunt van uw monster kennen, waardoor het moeilijk is om de juiste lyofilisator te kiezen.
Uw monsters kunnen tijdens het proces smelten. Een andere veel gemaakte fout is dat kouder beter is bij vriesdrogen op een vriesdroger van het schaptype. Tijdens het primair drogen, moet u de temperatuur van de tablet instellen op net onder de eutectische temperatuur van het monster. Er moet net voldoende warmte zijn om de moleculen van het monster aan te zetten om te bewegen, maar voorkomen dat ze smelten.
Een derde fout is het gebruik van de verkeerde apparatuur voor uw monsters. Omdat vriesdrogers worden gebruikt in een groepsomgeving, moet u het volgende weten voordat u er een aanschaft:
- Hoeveel vocht zal gelyofiliseerd worden
- Wat het monster is (en de eutectische temperatuur)
- Hoe de vriesdroger correct te gebruiken
Als het apparaat niet correct wordt gebruikt, kan het alle samples verpesten. Dat brengt ons bij een andere veelgemaakte fout: het niet onderhouden van de vacuümpomp. De pomp moet in uitstekende staat verkeren om lyofilisatie te laten werken. Het bedrijf van de pomp met de gasballast die 30 minuten voor en na het vriesdroog proces open is, verlengt de levensduur van de pomp. Het openen van de gasballast verwijdert verontreinigingen uit de pomp om schade aan interne componenten te voorkomen. U moet de pompolie vaak controleren op verkleuring en deeltjes en de olie zo nodig vervangen. Regelmatige olieverversingen zorgen ervoor dat de pomp tijdens het vriesdroogproces optimaal vacuüm krijgt.
Tenslotte kan het hebben van de verkeerde vriesdroogaccessoires voor uw lyofilisatieproces ook een grote vergissing zijn. Heeft u een stopmonster nodig onder uw vacuüm? Dan is een stopkamer vereist. Vouwt u vriesdrogen in kolven? Zorg dan voor een droogkamer met poorten.
Door bovenstaande fouten te vermijden, kunt u uw vriesdroger en pomp beter onderhouden en heeft u betere monsters wanneer uw vriesdrogen is voltooid.
Referenties
Labconco Nieuws. "Top 5 fouten gemaakt in het lyofilisatieproces." http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes